Microscope inversé avec scanner spinning-disk et lecteur de microplaques

Le marché porte sur la fourniture, la livraison et l’installation d’un microscope inversé motorisé réunissant dans un seul équipement un scanner confocal spinning-disk et un lecteur de microplaques. Il est destiné à l’imagerie d’échantillons vivants et à l’étude de modèles 3D, notamment organoïdes et cultures organotypiques de plus de 500 µm d’épaisseur.

Le microscope doit comporter au minimum quatre lasers et les filtres associés à l’imagerie DAPI/Hoechst, GFP et dérivés, mCherry et dérivés, ainsi qu’un fluorophore dans le rouge lointain. Le scanner spinning-disk doit fournir un champ large, une illumination homogène et permettre l’imagerie d’échantillons de plus de 6 mm de diamètre, avec assemblage rapide et simple des images. Les supports observables incluent des plaques de 96 à 6 puits, des boîtes de Petri et des lames ; des adaptateurs sont prévus pour ces formats.

La configuration comprend six objectifs : un 4×, un 10×, un ou deux 20×, un ou deux 40× et un 60×. Un objectif 20× doit avoir une distance de travail d’au moins 550 µm ; un objectif 20× ou 40× doit présenter une grande distance de travail supérieure à 2 mm. Les objectifs à air sont privilégiés. En cas d’objectifs à immersion, leur nettoyage doit rester accessible dans la chambre ou une solution alternative doit être proposée. La caméra haute sensibilité et grand champ est souhaitée si possible.

Lecture de plaques et incubation

Le lecteur intégré réalise des mesures d’absorbance, de fluorescence et de luminescence. La sélection des longueurs d’onde repose au minimum sur un monochromateur, avec balayage en excitation et en émission. La lecture de fluorescence doit être possible par le dessus et le dessous des plaques, ainsi que les mesures FRET, TR-FRET, BRET et (H)TRF. Le couplage à l’imagerie permet l’acquisition en Z, la reconstitution 3D, le contrôle de la température et la gestion des gaz (CO₂, O₂…). Les fonctions de lecture incluent aussi la mesure de confluence, le dénombrement de cellules sans marquage, et le comptage de plages de lyse ou de foyers/spots lorsque l’agent ne produit pas de plage de lyse.

La chambre d’incubation est opaque et permet des acquisitions en temps réel sur plusieurs heures ou jours. Elle doit offrir un accès adapté aux dispositifs internes et aux contraintes de manipulation avec les EPI du laboratoire ; une trappe d’accès d’au moins 13 cm de haut sur toute la longueur est indiquée comme configuration idéale.

Implantation, pilotage et sécurité biologique

L’équipement doit être compact, protégé par un carter en plastique à angles arrondis et sans parties saillantes rédhibitoires. Le carter doit pouvoir être retiré ou comporter des accès permettant les interventions et la décontamination par produits gazeux ou nébulisés. Les surfaces et matériaux doivent tenir compte de la résistance aux ammoniums quaternaires et au H₂O₂ et ne pas créer de zones inaccessibles à l’application d’un biocide. Câbles, prises et éventuelles tubulures sont intégrés ou agencés pour être protégés pendant les expérimentations et faciles à décontaminer.

La limite d’encombrement indiquée pour l’ensemble sur la table est de 100 × 70 × 70 cm (hauteur × largeur × profondeur) ; les modules annexes doivent pouvoir être rangés sur des étagères sous ou au-dessus de la table. La table anti-vibrations est recouverte d’un film adhésif étanche, transparent et résistant aux produits précités ; le film n’est perforé au niveau des trous de fixation qu’en cas de besoin. Un support posé sur une paillasse préexistante de 100 × 70 × 70 cm est une solution préférentielle, soumise aux mêmes exigences de décontamination.

Le pilotage s’effectue par un système déporté simple d’usage ; les écrans tactiles sont à éviter et, s’ils sont proposés, leur fonctionnement doit être testé. Le logiciel pilote l’appareil et traite les données, permet la visualisation pendant l’acquisition, fonctionne sous un environnement de type Windows 11 et produit des fichiers compatibles avec les logiciels classiques d’analyse d’imagerie. La connexion entre PC et appareil est obligatoirement filaire : Wi-Fi, Bluetooth et autres réseaux à distance sont interdits. Le matériel informatique nécessaire est inclus ; au moins deux licences sont demandées et un accès gratuit du logiciel pour les utilisateurs constitue un plus.

Livraison, formation et accompagnement

La livraison est assurée par le titulaire, qui assume transport, conditionnement, chargement, arrimage, déchargement et manutention sur site, à ses risques. La livraison complète est prévue en une fois ; une livraison partielle requiert l’accord exprès préalable de l’Inserm.

La formation inclut l’utilisation de l’instrument et du ou des logiciels pour environ cinq personnes, ainsi que la formation à la maintenance de premier niveau et à celle de deuxième niveau pour deux ou trois personnes. Les frais correspondants sont à la charge du titulaire. La documentation comprend un manuel opérateur pour l’instrument et les logiciels, ainsi que des descriptifs techniques exhaustifs des éléments constitutifs, schémas d’implantation, PID, manuels et schémas électriques et électroniques.

Pendant la garantie, les services minimums prévoient une visite de maintenance préventive au moins tous les 18 mois, des visites correctives illimitées avec main-d’œuvre, déplacement, pièces et consommables nécessaires, ainsi qu’une hotline illimitée avec canal privilégié. Le délai d’intervention en cas de panne est fixé à deux jours calendaires dans les exigences du CCTP ; la clause décrivant les services correctifs de garantie mentionne une intervention sur site sous quatre jours calendaires maximum. Le dépannage s’effectue sur site ; la sortie de l’appareil n’est envisagée qu’à titre exceptionnel et après décontamination. La prise en charge par un personnel compétent est alors prévue en moins de deux jours ouvrables après déclaration de panne.