Caractérisation d'anticorps monoclonal par HDX-MS
Caractérisation par HDX-MS
Objectif
Caractériser structurale et fonctionnellement un anticorps monoclonal et son antigène par cartographie d'épitope via HDX-MS, avec raffinement des résultats par méthodes d'intelligence artificielle.
Pré-analyse et contrôles qualité
- Vérification de la qualité et de la compatibilité des échantillons.
- Cartographie peptidique préliminaire (digestion protéolytique et identification des peptides observables).
- Contrôles de traçabilité et de conformité des échantillons à l'entrée.
Expérimentation HDX-MS
- Expériences d'échange hydrogène/deutérium comparant antigène libre et complexe anticorps–antigène.
- Séries de temps multiples d'incorporation du deutérium couvrant plusieurs fenêtres cinétiques.
- Réplicats techniques pour assurer reproductibilité et évaluation statistique des variations d'uptake.
- Optimisation des conditions expérimentales : choix et optimisation de la digestion protéolytique, optimisation de la couverture peptidique et maintien de la stabilité du complexe pendant l'essai.
Traitement des données et raffinement IA
- Traitement des spectres HDX-MS, quantification des profils d'incorporation du deutérium par peptide.
- Analyse comparative statistique des différences d'uptake entre états libre et lié.
- Raffinement des cartographies via algorithmes d'intelligence artificielle/bioinformatique structurale pour soutenir l'interprétation des épitopes conformationnels et linéaires.
Livrables et restitution scientifique
- Rapports PDF contenant : cartographie peptidique identifiée, profils d'incorporation du deutérium, graphiques comparatifs d'uptake, identification des régions d'interaction (épitope et paratope), représentations structurales du complexe et interprétation scientifique.
- Fourniture d'éléments graphiques exploitables (figures, tableaux de données) et explication méthodologique des analyses.
- Support scientifique et échange technique final pour restitution des résultats.
Garanties et confidentialité
- Respect d'un accord de confidentialité (NDA).
- Obligation d'alerter en cas de problème analytique et de garantir la confidentialité et l'intégrité des données et des résultats.
- Transfert des droits d'utilisation des résultats selon les conditions prévues.
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Critères d'évaluation
| Pondération | Critère |
|---|---|
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Échantillons
Modalités de livraison
Échantillons fournis sous forme congelée en microtubes. Conservation et transport recommandés à -20°C ou sur carboglace. Réception et contrôle à l'arrivée par le laboratoire exécutant avec accusé de réception; validation des échantillons préalable au lancement des analyses.
Produits à fournir
- Anticorps monoclonal (échantillon)
- Antigène cible (échantillon)
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