Extraction d'ADN à partir de tiques collectées

Office français de la biodiversité
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Date limite
27 juillet 2026 à 10 h
Localisation
Non précisé
Durée
1 an, renouvelable 3 fois (jusqu'à 4 ans)
Budget
Max: 130 000 € - Estimation: 5 480 €

Extraction et traitement d'ADN

Objectif

Extraire de l'ADN à partir de tiques (tiques libres ou en cours de gorgement) et, le cas échéant, à partir d'échantillons de sang d'hôtes, en vue d'analyses PCR ciblées et d'identification d'espèces.

Réception et stockage des échantillons

  • Réception des tubes Eppendorf contenant des tiques ou du sang conservés dans l'alcool.
  • Registre des échantillons sous forme de tableur avec identifiants uniques.
  • Stockage à -20 °C; possibilité de stockage à 4 °C avant extraction selon instructions.

Pré-traitement des tiques

  • Élimination de l'éthanol.
  • Lavage dans deux bains successifs de 5 minutes avec eau milliQ.
  • Séchage sur papier absorbant.
  • Transfert dans tubes de lyse (NucleoSpin Bead Tube Type D ou Lysing Matrix S selon protocole).
  • Inclusion systématique d'un témoin négatif d'extraction par série.

Extraction d'ADN

  • Mise en œuvre de kits commerciaux selon protocoles fabricants.
  • Kits acceptés : NucleoSpin DNA Insect (méthode dédiée) et NucleoSpin Tissue (méthode dédiée).
  • Pour l'extraction à partir de sang, utilisation exclusive du kit NucleoSpin Tissue et de la méthode associée.

Contrôle qualité et quantification

  • Contrôle qualité inclus pour chaque série d'extraction (à décrire dans l'offre).
  • Quantification des ADN extraits pour vérification du rendement et homogénéisation des concentrations pour analyses ultérieures.

Stockage, transfert et format des livrables

  • ADN extraits identifiés et stockés à -20 °C jusqu'envoi en colis froid vers le laboratoire partenaire.
  • Transmission d'un fichier de résultats exploitable (tableur ou équivalent) accompagnant chaque envoi.

Livrables et traçabilité

  • Rapports intermédiaires annuels décrivant méthodologie, résultats et fichiers de contrôle qualité (format exploitable).
  • Rapport final de synthèse quantitative et critique en PDF.
  • Documentation complète de traçabilité (identifiants d'échantillon, paramètres opératoires, témoins, courbes/mesures sur demande).

Conformité

  • Respect strict des protocoles fournis par les fabricants des kits sélectionnés.
  • Intégration des contrôles de qualité et conservation des archives et fichiers de traçabilité.

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