Criblage d'imagerie haute capacité sur modèles placentaires pour évaluation d'antiviraux

Mise au point des modèles et conditions d'imagerie

• Utilisation de niveaux de confinement L2 et L3 selon nécessité.
• Lignées cellulaires ciblées : HIPEC et JAR (incluant comparaison JAR WT vs JAR C19MC-KO).
• Établissement des conditions expérimentales : choix de MOI, temps d'infection, marquages, préparation d'échantillons en triplicat.
• Validation de la permissivité et du signal d'infection par comparaison JAR WT / JAR KO.
• Évaluation de la faisabilité et optimisation de l'imagerie sur explants placentaires ex vivo en modes confocal et Light Sheet.

Criblage et standardisation

• Calibration des essais et contrôle positif d'inhibition avec l'inhibiteur de référence 7DAM.
• Criblage automatisé de la banque Prestwick (1 280 composés) sur l'infection par Zika avec conditions en triplicat.
• Mesures automatisées d'infection : comptage cellulaire, quantification d'accumulation de protéines virales (marqueurs d'infection), détermination d'effets cytotoxiques.
• Évaluation automatisée de l'activité antivirale/provirale des EV issues de cellules JAR WT/KO et des EV contenant de l'ARN sfRNA ; préparation et caractérisation des EV prises en charge par l'équipe fournisseuse.
• Tests secondaires : évaluation de molécules actives identifiées sur explants placentaires infectés (analyses en triplicat).

Acquisition, traitement et livrables

• Utilisation de plateformes d'imagerie à haut débit adaptables à confocal / Light Sheet et pipelines d'analyse automatisée pour détection et quantification.
• Fourniture de jeux de données quantifiés, rapports méthodologiques détaillant conditions expérimentales, statistiques (réplicats, critères d'admission des essais) et interprétation des résultats.
• Protocoles de transfert d'échantillons biologiques et modalités de réception/traitement des EV et explants fournis par l'équipe coordinatrice.